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葡聚糖凝膠分離的技巧和使用心得

更新時(shí)間:2021-06-22瀏覽:973次

  葡聚糖凝膠指的是由一定平均相對分子質(zhì)量的葡聚糖(dextran)和甘油基以醚橋形式相互交聯(lián)而成,具有立體網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),應(yīng)用面廣的一類凝膠,國外商品名為Sephadex。交聯(lián)度的大小,可通過控制交聯(lián)劑(一般為環(huán)氧氯丙烷)和葡聚糖的配比以及反應(yīng)條件來控制。
  葡聚糖凝膠分離的技巧和使用心得:
  (1)流速不可太快,切切不可新急,所謂欲速則不達(dá)。
  (2)柱子盡可能長,SephadexLH20柱長的增加將極大地改善分離,所不要吝惜填料,寧可將填料全裝在一根大柱子中,不要將填料裝成幾根小柱。所謂集中優(yōu)勢兵力,打擊敵人。
  (3)餾分一定要接的細(xì),可1/10,或1/20個(gè)保留體積接成一餾分。
  (4)洗脫體積一般為2-3個(gè)保留體積,對特殊保留強(qiáng)的化合物,可洗脫5個(gè)保留體積。
  (5)鞣質(zhì)成分死吸附嚴(yán)重,如不在乎填料者,可用SephadexLH20分鞣質(zhì)。
  (6)SephadexLH20對黃酮類成分的分離效果,方法很成型,有大量文獻(xiàn)參考。
  (7)填料反復(fù)使用,每次用完,一般可用甲醇將柱子洗干凈,然后用下一次分離的起步溶劑將甲醇替換出來,待用。
  SephadexLH-20是由葡聚糖G-25羥丙基化加工而成,屬于分子篩凝膠,尤其適用于天然產(chǎn)物在有機(jī)溶劑中的純化。例如:類固醇、萜類、脂類以及小分子多肽等,PharmadexLH-20同時(shí)適用于分子類別非常相似的物質(zhì)的分離和工業(yè)規(guī)模的制備,既可用于初步純化步驟,也可用于終精制步驟,如非對映同分異構(gòu)體的分離。

 

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